在单细胞水平上，通过光镜定性检测细胞凋亡。

• 敏感：细胞凋亡（细胞染色）标签的大强度高于缺口翻译方法
• 快速：使用荧光的dUTP允许后直接TUNEL反应，但在此之前的二次检测系统除了对样品的分析
• 方便：直接标记程序，使用荧光素-dUTP标记允许在检测过程中的TUNEL反应效率的核查
• 准确：在分子水平（DNA链断裂）和细胞凋亡的早期阶段的细胞识别凋亡鉴定
• 灵活：无基板;提供了选择的机会，选择染色过程

样品材料：细胞离心涂片和细胞涂片准备，在幻灯片上生长的贴壁细胞，冷冻和石蜡包埋的组织切片。

广泛使用的方法，以确定细胞凋亡的基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳和DNA段分析基于分析3 H -胸苷，另外，5 -溴-2'-脱氧尿苷。该方法涉及从零散，低分子量的DNA不分段，高分子量的DNA分离在一个特定的细胞群。因此，这些方法并不在一个特定的细胞群提供单个细胞的命运的信息，特别是在组织切片。另外，个别细胞凋亡可能显微镜确认，因为核染色质凝聚和碎裂的外观特征，但这种方法是主观的，不限于一个相对狭窄的时间窗口时的形态学变化大的是细胞凋亡的特点是DNA降解，这是有选择性的DNA链接的internucleosomal地区处于早期阶段。可能产生DNA断裂双链和单链DNA断裂（尼克斯）。两种类型的休息可以自由3'-OH末端修饰核苷酸标记（例如在酶催化反应，生物素-dUTP标记，地高辛-dUTP标记，荧光的dUTP）检测。末端转移酶（TDT）催化脱氧模板独立聚合单和双链DNA的3'-末端。这种方法也被称为TUNEL法（牛逼 ð ü DT-介导的TP-X的列印 ICK é ND 升abeling）。另外，自由3'-OH基团，可使用DNA聚合酶标记通过名为尼克翻译的模板依赖的机制。然而，TUNEL法被认为是更敏感和更快捷。

1. 酶液（TDT），5瓶
2. 标签解决方案（荧光的dUTP），5瓶
3. 转换器AP（反荧光抗体AP），准备使用的

在原位细胞凋亡检测试剂盒，AP是基于检测单和双链DNA断裂，细胞凋亡的早期阶段发生的
细胞凋亡是固定的，透。随后，细胞培养与TUNEL反应混合物，其中包含TDT和荧光的dUTP。在此潜伏期，末端转移酶催化荧光的dUTP除了免费单和双链DNA的3'-OH组。洗涤后，记者酶碱性磷酸酶共轭反荧光抗体标记的DNA受损部位纳入标签。洗涤除去未结合的酶标记物后，AP保留在免疫复合物是由底物反应的可视化。

图1： 示意图显示喔那些点点滴滴在原位细胞死亡检测试剂盒，AP和POD 的原则